垂直電泳槽染色與脫色注意

更新時(shí)間：2020-05-12

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垂直電泳槽是一種與圓盤(pán)電泳槽在原理與結(jié)構(gòu)上略有相似，卻在制膠和電泳方面存在某些差異的電泳槽種類中的一種。它一般被應(yīng)用于分子生物學(xué)等領(lǐng)域。由于垂直電泳槽在使用過(guò)程中的要求較高，所以在使用時(shí)應(yīng)當(dāng)注意以下幾點(diǎn)：

分離膠濃度的選擇。低濃度膠對(duì)大分子量蛋白質(zhì)分離效果好：高濃度膠對(duì)小分子量蛋白質(zhì)分離效果好；

清洗玻璃板。玻璃板應(yīng)清洗干凈，玻璃表面的油污會(huì)造成分離膠與濃縮膠界面的不平整。經(jīng)用去污劑洗滌后的玻璃板先用蒸餾水沖洗，再用紗布蘸乙醇擦拭玻璃表面；

TEMED的加入量。TEMED是促進(jìn)丙烯酰胺聚合的加速劑。加*果隨試劑保存時(shí)間而變化。對(duì)于陳舊試劑，可適當(dāng)多加。事實(shí)上，配制分離膠時(shí)每塊膠板按2滴加入，效果也不錯(cuò)；

丙烯酰胺的毒性。丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺都是神經(jīng)性毒劑，對(duì)皮膚有刺激作用。但在形成凝膠后則無(wú)毒。操作時(shí)應(yīng)戴橡膠或塑料手套，盡量避免接觸皮膚，并注意實(shí)驗(yàn)后洗手；

電極緩沖液的配制。電極緩沖液的用量大、占體積、配制麻煩。如果經(jīng)常跑膠，可考慮配制5X濃度的濃縮液。方法如下：將144g甘氨酸和30﹒2gTris溶于1升蒸餾水中。使用時(shí)稀釋5倍。

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